胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)指通过对未出生的胎牛行穿刺采血,再经自然层析、离心、三级0.1µm微滤等处理而得到的上清液。
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首先甄选符合要求的高质量的供体,将胎牛从母体内取出,对胎牛进行穿刺取血,采血过程中要保证无菌操作,且红细胞不可破裂过多,影响血清质量。接下来冷冻离心,收集血清,冻存,血清解冻后进行0.1um三次过滤,避免病原微生物的污染,此过程之后会对血清进行质检和定级,最后全程冷链保存和运输。
①各种蛋白:白蛋白、球蛋白、纤连蛋白、转铁蛋白等;
②因子:各种生长因子等;
③各种激素:胰岛素、促生长激素、氢化可的松等;
④其他微量元素、维生素、离子等;
⑤不明确的成分:由于胎牛血清是天然生物制品,FBS中还存在部分不明确的生物成分。
①提供营养胎牛血清中的各种蛋白可提供细胞分裂所需的营养物质②促进生长胎牛血清中的各种生长因子和激素可促进细胞生长③保护细胞胎牛血清带有一定粘稠度,且有酸碱缓冲液的作用,可保护细胞④提供蛋白酶抑制剂提供蛋白酶抑制剂,中和剩余的胰蛋白酶的消化,保护细胞⑤提供贴壁因子胎牛血清提供贴壁因子,是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子的来源。
①正确地储存胎牛血清应在-20°C长期保存,如在4℃保存,不应超过1个月。在使用时注意分装使用。避免反复冻融。② 正确地解冻 可在4℃冰箱过夜解冻。推荐使用血清融化三步法:即将500ml血清在室温下放置1.5h,20℃水浴25min,37℃ 水浴35min。③正确地使用配制完全培养基尽可能“现用现配”,并于一周内用完。避免胎牛血清在37°C静置过久。
王贝 | 文案
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